Ďalšou stále nevyriešenou záhadou Mony Lisy je, koho da Vinci vlastne namaľoval: v Taliansku i vo Francúzsku je obraz známy aj pod názvom La Gioconda, pretože panuje presvedčenie, že by malo ísť o portrét Lisy del Giocondo - manželky florentského obchodníka. Ďalšie teórie naznačujú, že renesančný maliar namaľoval inú ženu alebo dokonca muža. Pripúšťa sa aj, že nejde o zvečnenie reálne žijúceho človeka.
Je to maľba olejovou farbou na topoľové drevo technikou sfumato - ide o prekrývanie prechodov medzi svetlom a tieňom, tzv. efekt šerosvitu. Žena na obraze sleduje diváka s nenapodobniteľným, tajuplným úsmevom, ktorý sa tiež stal predmetom mnohých špekulácií. V súčasnosti je tento obraz vystavený v parížskom múzeu Louvre.